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脂褐素染色液(LONGZIEHL-NEELSEN法)的操作方法
背景及概述[1]
脂褐素是具有颗粒状的褐黄色色素,由含有脂肪的残存物和溶酶体消化物组成,被认为是由脂质和脂蛋白氧化产生的。脂褐素氧化过程是缓慢的、逐步发生的,因此色素会呈现出不同的染色反应、不同的颜色,形状和大小也变化不一。脂褐素可见于肝脏、肾脏、心肌、肾上腺、神经细胞与神经节细卡博特炭黑胞等,多分布在细胞核周围。由于脂褐素是由脂质和脂蛋白缓慢氧化逐步形成的,色素所处的氧化程度不同,可以用脂褐素染色液(LONGZIEHL-NEELSEN法)证实来验证色素是否是脂褐质。
其他常用的方法还有PAS法、Schmorl高铁-铁氰化物还原法、Gomori醛复红法、Masson-Fontana银法等。
操作步骤[1]
1、处理载玻片。
溶剂染料生产厂家2、组织固定,常规脱水包埋。
3、常规脱蜡至水。
4、组织切片裱贴于载玻片上。
5、载玻片入蒸馏水轻轻清洗。
6、入复红染色液加盖浸染,水浴或室温过夜。
7、自来水洗净。
8、入Long酸性分化液中分化,直至背景染色被去除。
9、流动自来水洗净。
10、入亚甲蓝染色液复染胞核。
11、入乙酸溶液轻轻清洗。
12、常规脱水,常规透明,合成树脂封片。
染色结果[1]
脂褐素、蜡样物质:棕黑色。
细胞核蓝色:背景淡红紫或淡蓝色。
主要参考资料
[1]脂褐素染色液(LONGZIEHL-NEELSEN法)说明书
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