背景及概述^[1]

硫堇染色液(1%)可用于口腔黏膜、尿液、羊水、绒毛细胞以及人工培养细胞等样本的染色体染色，尤其适用抗氧化剂1010于性染色质的染色；硫堇染色液(1%)亦可用于肥大细胞的染色，异染性物质呈紫红色，其他呈蓝色。仅供科研使用，不得用于临床。

操作步骤^[1]

A、样本处理

1、口腔黏膜细胞：

a、用PBS或生理盐水漱洗口腔数次，尽量去除口腔内细菌和其他杂物。

b、操作人员一手拉住患者的下唇，一手用压舌板或牙签钝头端刮取两侧颊部或下石油树脂的用途唇内侧的粘液，丢弃第一次刮取的细胞。

c、同一部位连续刮取数次，将刮取物涮入装有5ml生理盐水的离心管中。

d、离心，弃上清液，留取细胞团。

e、加入新鲜固定液轻轻混匀制成悬液室温放置。

f、取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

2、尿液中脱落细胞：

a、取患者干净的中段尿液，混匀，吸取至离心管中。

b、离心，弃上清液，留取细胞团。

c、根据细胞的多少，加入数滴新配制的固定液，充分混匀制成悬液。

d、取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

3、羊水细胞：

a、按妇科常规经腹壁穿刺妊娠16周左右孕妇的羊水至离心管中，抽取羊水时先抽取丢弃，以免母体细胞的污染。

b、离心，弃上清液，留取细胞团。

c、加入新鲜固定液，轻轻混匀制成悬液，室温放置。

d、离心，弃上清液，留取细胞团。

e、根据细胞的多少，加入数滴新配制的固定液，充分混匀制成悬液。

f、取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

B、染色质染色

a、玻片标本置于HCl中，37℃孵育。

b、蒸馏水充分冲洗，自然干燥。

c、将玻片样本浸入硫堇染色液(0.4%)染色。

d、蒸馏水冲洗，自然干燥。

e、在低倍镜下查找均匀分散的细胞群，转油镜认真观察。

C、染色结果

异染性物质呈紫红色，其他呈蓝色。

注意事项^[1]

1、涂片厚薄适宜，固定后方可染色。

2、所加硫堇染色液(1%)以覆盖涂片为宜，不能过少，以免蒸发而染料沉淀。

3、冬季染色时，如环境温度较低时，苏木素、橙黄、伊红的染色时间可适当延长。

4、固定液应定期更换，以免固定不充分导致着色不佳。

5、染色液应定期更换，以免影响染色效果。

主要参考资料

[1] 硫堇染色液(1%)说明书