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五氟苯酚生物素酯的制备方法
背景及概述[1]
生物分子的化学修饰在本领域中是公知的。用于标记,标签和报告分子与生物分子的共价连接的试剂和方法在生物化学,分子生物学和诊断学领域提供了有价值的工具。标记的生物分子尤其可用于检测生物样品中的靶组分和分离靶分子。
利用特异性结合实体,包括生物素-抗生物素蛋白/链霉抗生物素蛋白系统。生物分子优选与生物素连接,并且抗生物素蛋白(或链霉抗生物素蛋白)缀合的荧光染料或酶用于检测生物素标记。生物素与抗生物素蛋白(或链霉抗生物素蛋白)缀合物之间的特异性结合亲和力提供了将荧光染料,酶或EM标记物附着到生物分子上的特异性,五氟苯酚生物素酯为生物素化学修饰产物,通过五氟苯酚和D-生物素合成五氟苯酚生物素酯,收率约98%;通过三氟乙酸五氟苯酯和D-生物素合成五氟苯酚生物素酯,收率约95%。
制备[1]
五氟苯酚生物素酯,又称为d-生物素-O-PFP,如下合成:将1mmold-生物素,0.1mmolDIEA,0.1mmolHOBT,1.2mmolPFP溶于10mlDMF中。向混合物中加入1.1mmolDCC。在室温下反应进行反应24小时,同时摇动。滤出混合物中出现的白色晶体。向溶液中加入10mlDCM以沉淀d-生物素-O-PFP。用DCM洗涤沉淀物,并从甲醇:乙酸乙酯溶液中结晶。d-生物素-O-PFP的产率为53%,熔点172-174℃,MW为410gr/mol,O.D。271纳米。
主要参考资料
[1] US2009203879ACTIVATEDLABELINGREAGENTSANDMETHODSFORPREPARINGANDUSINGTHESAME
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