背景^[1-3]

三磷酸肌苷焦磷酸酶抗体是一类可以特异性结合三磷酸肌苷焦磷酸酶的多克隆抗体，主要用于检测三磷酸肌苷焦磷酸酶的免疫学实验。

肌苷三磷酸（ITP）是细胞的正常成分，参与许多生化反应，是参与嘌呤代谢途径的中间产物，存在于ATP和GTP的生成中。它包含一个肌苷核苷酸，包含三个酯化到糖部分的磷酸基。

三磷酸肌苷焦磷酸酶

焦磷酸酶是作用于双磷酸键上的酸酐水解酶。是一种催化一分子焦磷酸盐转化为两分子磷酸盐离子的酶。焦磷酸酶的功能乃是在脂代谢（包括脂合成与分解）、钙吸收以及骨形成和DNA合成中扮演重要角色，其他生物化学转化也是如此。

三磷酸肌苷焦磷酸酶（ITPase）是一种胞质酶，属于HAM1 NTPase家族。ITPase将非规范的嘌呤花王抗静电剂核苷酸肌苷三磷酸（ITP）和脱氧肌苷三磷酸（dITP）水解为单磷酸核苷酸（IMP）和二磷酸。ITPase酶充当同型二聚体，不能区分脱氧和核糖形式。ITPase可能将非规范嘌呤排除在RNA和DNA前体库中，从而防止其掺入RNA和DNA并避免染色体损伤。ITPase的缺陷被认为是遗传性的，其特征是ITP在红细胞，白细胞和成纤维细胞中过度积累。

应用^[4][5]

用于肾移植受者TPMT和ITPA基因多态性与硫唑嘌呤所致不良反应关系的研究

硫嘌呤甲基转移酶（TPMT）和三磷酸肌苷焦磷酸酶（ITPA）都与AZA的代谢有关,由于控制TPMT和ITPA的基因具有遗传多态性,使AZA在人群中的代谢呈现明显的多态性,进而使不同个体药物的作用强度和毒性亦不同。因此,在器官移植患者中,研究TPMT和ITPA基因多态性与AZA所致不良反应的关系,有助于实现AZA用药个体化,避免产生严重的不良反应。

研究征选155例服用或曾经服用过AZA的肾移植受者做为研究对象,建立了新的高效液相色谱法（HPLC）荧光检测其红细胞TPMT活性,确定TPMT活性分布。采用等位基因特异性的PCR和限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）的方法,检测了TPMT*2、TPMT*3A、TPMT*3B和TPMT*3C的基因突变频率。此外,本研究以健康受试者为研究对象,考察了环孢素、氢化可的松和硝苯地平等肾移植受者常用药物对TPMT活性的影响。另一方面,本研究建立了新的HPLC法检测这155例肾移植受者红细胞ITPA活性,确定ITPA活性分布。采用实时荧光定量PCR和PCR-RFLP法检测了ITPA 94C>A和IVS2+21A>C的基因突变频率。在此基础上,结合这155例肾移植受者发生不良反应的情况,系统地分析了TPMT和ITPA活性和基因多态性与AZA所致不良反应的关系。

结果显示,155例患者TPMT活性范围为13.0468.25U,平均活性为（36.00±12.32）U,呈正态分布。30例患者（19.4%）显示TPMT中等活性,未发现TPMT低活性或该酶活性缺乏者。共发现7例TPMT*3C突变基因杂合子个体,其突变频率为2.26%,7例患者均表现为中等TPMT活性,说明TPMT*3C基因突变可导致TPMT活性的降低。

在体外,环孢素、氢化可的松、卡托普利以及别嘌呤醇,对TPMT活性抑制作用较弱。硝苯地平能明显抑制TPMT的活性,中等活性组的平均IC50值为（24.37±16.64）μg·mL-1,正常活性组的平均IC50值为（11.81±10.03）μg·mL-1。155例肾移植受者ITPA活性范围为0191.2U,平均为（96.1±37.1）U,呈双峰分布。

参考文献

[1]Genetic basis of inosine triphosphate pyrophosphohydrolase deficiency in the Japanese population[J].Tohru Maeda,Satoshi Sumi,Akihito Ueta,Yumiko Ohkubo,Tetsuya Ito,Anthony M.Marinaki,Yukihisa Kurono,Shinsaku Hasegawa,Hajime Togari.Molecular Genetics and Metabolism.2005(4)

[2]Interference free and simplyfied liquid chromatography-based determination of thiopurine S-methyltransferase activity in erythrocytes[J].Maurice N.Khalil,Norbert Erb,Philipe N.Khalil,Gabriele Escherich,Gritta E.Janka-Schaub.Journal of Chromatography B.2005(1)

[3]Mutation in the ITPA pp附着力促进剂Gene Predicts Intolerance to Azathioprine[J].A.M.Marinaki,J.A.Duley,M.Arenas,A.Ansari,S.Sumi,C.M.Lewis,M.Shobowale-Bakre,L.D.Fairbanks,J.Sanderson.Nucleosides,Nucleotides and Nucleic Acids.2004(8-9)

[4]Allele Frequency of Inosine Triphosphate Pyrophosphatase Gene Polymorphisms in a Japanese Population[J].A.M.Marinaki,S.Sumi,M.Arenas,L.Fairbanks,S.Harihara,K.Shimizu,A.Ueta,J.A.Duley.Nucleosides,Nucleotides and Nucleic Acids.2004(8-9)

[5]熊晖.肾移植受者TPMT和ITPA基因多态性与硫唑嘌呤所致不良反应关系的研究[D].华中科技大学,2008.