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磷酸化干扰素调节因子3兔单克隆抗体
背景[1][2][3][4][5]
Phospho-IRF3(Ser386)Rabbit Monoclonal Antibody(磷酸化干扰素调节因子3兔单克隆抗体)是用磷酸化干扰素调节因子3对兔进行系统免疫然后筛选出兔磷酸化干扰素调节因子3致敏B细胞后与骨髓肿瘤细胞杂交最后制得既能产生单一抗体,又能无限增殖的杂种细胞系。干扰素调节因子3,也称为IRF3,是干扰素调节因子。IRF3是干扰素调节转录因子(IRF)家族的成员。IRF3最初发现作为同源物的IRF1和IRF2。IRF3已被进一步表征并显示含有几个功能结构域,包括核输出信号,DNA结合结构域,C末端IRF结合结构域和几个调节磷酸化位点。
IRF3以无活性的细胞质形式存在,丝氨酸/苏氨酸磷酸化形成与CREBBP的复合物。这种复杂的易位进入细胞核并激活干扰素α和β的转录,以及其他干扰素诱导的基因。IRF3在先天免疫系统对病毒感染的反应中起重要作用。聚合MAVS已经发现激活IRF3二聚化。
最近的一项研究表明,先天性免疫接头蛋白MAVS,STING和TRIF在保守的pLxIS基序上的磷酸化招募并指定了丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶TBK1的IRF3磷酸化和活化,从而限制了I型干扰素的产生。另一项研究表明,IRF3-/-敲除可以预防心肌梗死。同一项研究确定IRF3和I型IFN反应作为心肌梗死后的潜在治疗靶点心脏保护作用。
研究应用[6]
Phospho-IRF3(Ser386)Rabbit Monoclonal Antibody(磷酸化干扰素调节因子3兔单克隆抗体)可用于研究LXRα通过下调IRF3、GRIP1负性调控Kupffer细胞中LPS诱导的炎症反应机制。
方法:通过观察肝X受体α(LXRα)激动剂对脂多糖(LPS)刺激后Kupffer细胞干扰素调节因子3(IRF3)、糖皮质激素受体反应蛋白1(GRIP1)、LXRα表达的影响,探讨LXRα负性调控炎症反应的相关机制。方法采用胶原酶原位灌注法分离和培养雄性KM小鼠肝脏中的Kupffer细胞,所得细胞在含20%小牛血清和1%青霉素/链霉素的1640培养基中培养。将分离的Kupffer细胞随机分为4组:空白对照组、TLR4配体激活剂LPS(1μg/ml)组、LXRα配体激活剂T0901317(5μg/ml)组、LPS和T0901317共同处理组。收集培养细胞,采用Western boltting法检测Kupffer细胞的LXRα、GRIP1及IRF3蛋白表达水平。ELISA检测Kupffer细胞培养上清液中干扰素(IFN)β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量。
结果LXRα蛋白质表达水平在T0901317处理组最高,LPS处理组最低。联合处理组中,LXRα表达明显低于T0901317处理组(P<0.05),但又显著高于其他两组(P<0.05)。IRF3及GRIP1蛋白表达量在LPS组最高,联合处理组表达明显降低,两组间均有显著差异(P<0.05);在LPS组及联合处理组中,IRF3及GRIP1蛋白表达量均高于对照组及T0901317处理组(P<0.05)。
IFNβ在LPS处理组的含量较对照组和T0901317处理组明显增高(P<0.05);联合处理组IFNβ含量比LPS处理组明显降低(P<0.05);IFNβ表达T0901317处理组表达最低。TNF-α在LPS处理组的含量较其他3组明显增高(P<0.05);对照组、T0901317处理组和联合处理组水平较低,且他们3组之间无明显差别(P>0.05)。IL-1β的表达趋势与TNF-α相同。结论在应用LPS处理之前预防性应用LXRα激动剂,能明显抑制Kupffer细胞的IRF3及GRIP1表达,通过抑制IRF3、GRIP1的表达而发挥抗炎效应,从而抑制LPS所诱导的Kupffer细胞活化。
参考文献
[1] Hiscott J,Pitha P,Genin P,Nguyen H,Heylbroeck C,Mamane Y,Algarte M,Lin R(1999)."Triggering the interferon response:the role of IRF-3 transcription factor".J.Interferon Cytokine Res.19(1):1–13.doi:10.1089/107999099314360.PMID 10048763.
[2] Lin R,Heylbroeck C,Genin P,Pitha PM,Hiscott J(Feb 1999)."Essential Role of Interferon Regulatory Factor 3 in Direct Activation of RANTES Chemokine Transcription".Mol Cell Biol.19(2):959–66.doi:10.1128/MCB.19.2.959.PMC 116027.PMID 9891032.
[3] Yoneyama M,Suhara W,Fujita T(2002)."Control of IRF-3 activation by phosphorylation".J.Interferon Cytokine Res.22(1):73–6.doi:10.1089/107999002753452674.PMID 11846977.
[4] Collins SE,Noyce RS,Mossman KL(Feb 2004)."Innate Cellular Response to Virus Particle Entry Requires IRF3 but Not Virus Replication".J Virol.78(4):1706–17.doi:10.1128/JVI.78.4.1706-1717.2004.PMC 369475.PMID 14747536.
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[6] LXRα通过下调IRF3、GRIP1负性调控Kupffer细胞中LPS诱导的炎症反应机制[J].欧志兵,黄庆勇,孙科,魏思东,龚建平,涂兵.南方医科大学学报.2009(05)
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