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3-磷酸甘油醛脱氢酶的介绍
背景及概述[1]
3-磷酸日本三菱甘油醛脱氢酶,英文名(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPD)。3-磷酸甘油醛脱氢酶,它可以催化3-磷酸甘油醛氧化(脱氢)和磷酸化,生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖代谢的中心环节,故对糖代谢起着重要的作用。3-磷酸甘油醛脱氢酶广布于人体各组织器官,脂肪组织含量较低,肺含酶量约为脂肪组织的10倍,肝、心含量相近,约为脂肪组织的30倍,以骨骼肌、红细胞和肾中的含量最为丰富。急性肝炎、酒精性肝病、肝硬变等可致血清GAPD总活性升高。慢性肾盂肾炎、多发性骨髓病、肺炎、肺气肿等病人血清 GAPDA活性呈不同程度的升高。3-磷酸甘油醛脱氢酶的应用前景十分广阔,它是糖代谢的中心环节,对糖代谢起着重要的作用,而对于体内缺乏此酶,糖代谢有问题的病人,通过食用含有此酶的药物,可以使病情得以缓解,治疗。该酶还分布于人体各组织器官故通过对3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性检测就可以推断是否患有此类病,对于疾病的预防有着很大作用。
制备[1]
CN201711376257.7提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体。得到了来源于细菌中的3-磷酸甘油醛脱氢酶,而且该3-磷酸甘油醛脱氢酶具有低温酶的特性,制备得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体,能够准确检测3-磷酸甘油醛脱氢酶。本发明的目的之一是提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶的氨基酸序列;所述3-磷酸甘 油醛脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的目的之二是提供一种编码3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列;所述3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的目的之三是提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体制备方法。包括以下步骤:1)以氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的3-磷酸甘油醛脱氢酶为抗原,免疫小鼠制备抗血清;2)纯化抗血清得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克二甲基硅油乳化剂隆抗体。进一步地,所述3-磷酸甘油醛脱氢酶的制备方法为:1.1)利用PCR技术扩增SEQ ID NO.2所示的碱基序列;1.2)将SEQ ID NO.2所示的碱基序列克隆入载体质粒中,构建3-磷酸甘油醛脱氢 酶的表达载体;1.3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体,依次经扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白过程得到3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白。图3为重组菌株Ecoli BL21-pET21a-GPR表达3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白的聚丙烯 酰胺凝胶电泳鉴定图;其中M泳道为protein marker;1号泳道为3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白;
主要参考资料
[1] CN201711376257.7 3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体
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