背景及概述^[1]

花生四烯酸乙醇胺是人类发现的第一个内源性大麻素类似物，近年来，关于花生四烯酸乙醇胺含量的改变和疾病之间的关系的文献报道越来越多，有研究者认为，大麻受体内源性主要配体花生四烯酸乙醇胺在许多疾病中可能扮演了疾病前兆性指示物或疾病发生标志物的角色。目前对脂肪酸单乙醇酰胺的功效、生物代谢途径的研究大多基于体内提取，含量低，处理复杂。若能够进行体外合成，并对其进行富集纯化得到较高纯度的花生四烯酸单乙醇酰胺，不仅有利于科学基础研究，还将有望应用于药物治疗。根据目标产物合成途径的不同，其分离提纯的方法也存在差异。采用油脂法制备花生四烯酸乙醇胺的方法具有原料来源广泛，设备投资少，适合工业化的特点。但反应的粗产物中除了包含反应生成的副产物甘油和未发生反应伊士曼的单乙醇胺外，还含有较多的其他饱和或不饱和的脂肪酸乙醇酰胺。

制备^[1]

将富含花生四烯酸的微生物藻油(花生四烯酸含量43.69％，其他包含的脂肪酸有6.68％棕榈酸、5.81％硬脂酸、5.95％油酸、8.93％亚油酸、2.27％亚麻酸、4.2％花生三烯酸、3.2％山嵛酸、10.62％木焦油酸等)与单乙醇胺进行酰胺化反应。其中微生物藻油与单乙醇胺的摩尔比为1:3，按照质量体积比为1:1添加反应介质(正己烷:无水乙醇＝1：1,v/v)，0.3％的甲醇钠的甲醇溶液作为碱性催化剂，在25℃下搅三菱化学树脂拌反应2.5h，结束反应。经HPLC分析，脂肪酸乙醇酰胺含量为62.5％。按照尿素：95％乙醇＝1:2(m/v)于70℃下加热回流，待尿素完全溶解后，按混合脂肪酸单乙醇酰胺：尿素＝1:2(m/m)加入脂肪酸单乙醇酰胺，继续回流至溶液变澄清透明，停止反应并自然冷却至室温。然后在-40℃下脲包12h，取出后迅速抽滤分离，并用乙醇洗涤结晶物2～3次，合并滤液，移至分液漏斗，再加入无水乙醚和热水，轻轻震荡，充分萃取几次，静置分层。得到水相为尿素溶液，经一次低温结晶，滤液浓缩后二次结晶可得到尿素晶体回收干燥利用。合并有机相，用无水Na₂SO₄干燥，旋蒸去除溶剂，得到较高纯度的花生四烯酸乙醇胺。所得花生四烯酸乙醇胺纯度从42.17％提高到63.18％。

主要参考资料

[1] CN201610262212.6一种花生四烯酸单乙醇酰胺的纯化方法