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石碳酸复红染色液的说明和操作步骤
背景及概述[1]
石炭酸复红染色液与改良苯酚品红染色液不同。石炭酸复红染色液主要由石碳酸、碱性品红等组成,主要用于痰涂片或拭子结核杆菌染色和革兰氏染色,较少单独使用。改良苯酚品红染色液又称卡宝品红(Carbolfuchsin)染色液,主要由苯酚、碱性品红、山梨醇、氧化剂等组成,常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。石炭酸复红染色液主要用于抗酸杆菌染色和革兰氏染色中,亦可单独使用。
操作步骤[1]
(一)抗酸染色:
接种环挑取待检样本,涂布于载玻片上,自然干燥。滴加石碳酸复红染色液,染色5~10min。不有机硅涂料助剂必加热,蒸馏水冲洗。用脱色液脱色至无红色为止。蒸馏水冲洗。用亚甲基蓝染色液染色30~60s。蒸馏水冲洗。轻轻吸干水分,自然干燥。油镜镜检。
(二)石蜡切片染色:
1、石蜡切片脱蜡至水。2、滴加石碳酸复红染色液,染色3~5min。流水稍洗。3、盐酸乙醇分化5~10s。流水稍洗。4、直接二甲苯透明,树胶封片。
应用[2]
石炭酸复红染色液用于制备一种结核分枝杆菌及其表达蛋白染色的试剂盒及。提供了一种染色结核分枝杆菌及其表达蛋白的方法,包括如下步骤:1)对含有结核分枝杆菌的待测样本依次进行一抗孵育和二抗孵育,得到抗体结合产物;花王抗静电剂2)将所述抗体结合产物依次经DAB染色液染色、石碳酸复红染色液染色和苏木素染色液染色,实现染色结核分枝杆菌及其表达蛋白。实验证明,该试剂盒是能用于结核病病理学诊断的新试剂盒,该试剂盒可以实现在一张组织标本切片中同时检测结核分枝杆菌菌体及其表达的蛋白,从而提高结核病病理学诊断敏感性。该试剂盒使用方法简便,适用于病理科开展常规检测,具有良好的临床推广价值。
主要参考资料
[1] 石炭酸复红染色液说明书
[2] CN201510025852.0一种用于结核分枝杆菌及其抗原双重染色的试剂盒及其方法
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