背景及概述^[1]

醋酸洋红染色液是一种比较常用的碱性染料，常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。在观察植物细胞有丝分裂时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。花粉检测中，可以采用醋酸洋红检测花粉是否处于单核期。华越洋醋酸洋红染色液含高浓度乙酸和洋红，pH呈酸性，是很好的细胞核、线粒体染色剂。

操作说明^[1]

1、花粉类颗粒：取少量花粉物质置于载玻片，滴加适量醋酸洋红染色液，充分混合，立即盖片染色10～30min后，吸去多余液体，显微镜下观察。

2、动植物切片：常规byk附着力促进剂处理(如脱蜡至水)，滴加醋酸洋红染色液染色5～20min，自来水冲洗，封片，显微镜下观察。

3、部分新鲜植物组织(如洋葱表皮)，直接浸染于醋酸洋红染色液5～20min，自来水冲洗2～3min，置于载玻片并盖上盖玻片，显微镜观察。

注意事项^[1]

1. 染完色后，应立即显微镜下观察。

2、由于本试剂含有高浓度弱酸，有刺激性气味，请注意自我保护。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用^[2]

用醋酸洋红染色法观察到小孢子发育时期从而给取材提供参考，提高诱导率。以野生材料W1为试材，于盛花期采取花蕾。配置1%的醋酸洋红染色液：将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中，边煮边搅拌，煮沸(沸腾时间不超过30s)，冷却后过滤，再加入1%~2%铁明矾水溶液5~10滴，至溶液变为暗红色而不产生沉淀为止。用游标卡尺测量花蕾的横径和纵径，记录花药颜色，并用1%醋酸洋红染色压片、镜检。试验得出：(1)可以用醋酸洋红染色法观察小孢子发育时期，从而为取材提供参考；(2)同一花蕾内小孢子的发育不同步，但绝大多数处于同一发育时期；(3)所用的试验材料W1花蕾，横径为2.90~3.50mm，纵径为3.55~4.54mm的花蕾，大多数花蕾中的小孢子处于单核早中期或靠边期。醋酸洋红染色法是一种简单快捷的西瓜小孢子发育时期观察方法。通过用醋酸洋红染色压片可以观察到花粉母细胞、四分体时期、单核早中期、单核靠边期、双核期。西瓜雄核发育是花粉母细胞经减数分裂产生4个具有单细胞的花粉粒。小孢杜邦钛白粉子从四分体中释放后，细胞壁增厚变圆，细胞核位于中央，进入单核早中期，随着细胞体积的明显增大，花粉壁和液泡的形成，细胞核被挤到一边，即为单核靠边期。

主要参考资料

[1] 醋酸洋红染色液说明书

[2] 利用醋酸洋红染色法观察西瓜小孢子的发育时期