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苏木素染色液的分类和应用
背景及概述[1]
苏木素伊红染色方法,简称HE染色法,是组织学、胚胎学、病理学中使用最为广泛的技术方法。HE染色是将组织切片或细胞涂片等分别浸入苏木素染色液和伊红染色液中,经过适当的时间和处理,使组织、细胞及其他成分染上不同深浅的颜色,产生不同的折射率,从而便于光学显微镜下进行观察和研究。苏木素是一种碱性染料,由洋苏木中提取,被氧化后生成苏木因,同媒染剂共同使用,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色。
苏木素的分子式为C16H14O6。常用的苏木素染色液主要有Ehrlich苏木素染色液、Harris苏木素染色液、Cole苏木素染色液、Mayer苏木素染色液、Carazzi苏木素染色液、改良Lillie-Mayer苏丙烯酸树脂涂料木素染色液以及Gill改良苏木素染色液等。伊红,为酸性染料,分为水溶性和醇溶性两种,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。经过长期的使用,人们发现,现有的苏木素染色液也具有以下缺陷:1)易产生金属膜和染料沉淀,从而污染切片,且在制片过程中,切片上的上述污渍很难去除,导致染色不均,甚至出现无法读片,需要重新制片;2)在染色阶段易出现假性蓝色染色,将部分细胞质也染为蓝色,对后续观测结果的准确性产生影响。
制备[1]
苏木素染色液,每100ml所述苏木素染色液中包括如下组分:苏木素1g;铝盐:硫酸铝铵10g;氧化剂:红色氧化汞0.25g;苯扎氯铵0.1g;醇:乙醇10ml;弱酸:冰乙酸2.1g;余量为去离子水。其制备方法如下:a.按选定的比例取醇、苏木素,将所述苏木素加阻聚剂入醇中,溶解,得到苏木素醇溶液,备用;b.按选定的比例取水、铝盐,使所述铝盐完全溶解于水中,加入步骤a中得到的所述苏木素醇溶液,得到混合液;c.按选定的比例取氧化剂、苯扎氯铵、弱酸,将所述氧化剂搅拌加入步骤b中得到的所述混合液中,加热溶液变深紫色后,冷却,加入所述苯扎氯铵、弱酸,混合均匀,过滤,即得苏木素染色液。
主要参考资料
[1]CN201310750204.2一种苏木素染色液及其含苏木素染色液的HE染色液
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