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关于液相色谱能不能用四氢呋喃那些事
前段时间,有社交群里突然在讨论四氢呋喃(THF)到底能不能在液相色谱中使用。答案当然是可以的,但是相对于其他溶剂,可能会有更多需要注意的地方。
在开始今天的话题之前,我们先简单介绍下反相色谱常用的集中溶剂。反相色科莱恩颜料谱中,除了水以外,最常用的还有乙腈、甲醇、四氢呋喃。没错,四氢呋喃也是常用试剂之一。
我们先来看常用反相溶剂的吸收-波长曲线:
由于近年来对药物杂质谱的研究要求越来越高,导致杂质谱通常有不少组分,而为了同时兼顾不同的组分,从紫外吸收角度考虑,再加上乙腈较之甲醇和四氢呋喃有更低的柱背压,乙腈就变成了我们最喜欢选择的一种溶剂。在长时间的潜移默化中,甲醇因为价格、毒性低的优势还能占据部分主场,而四氢呋喃,由于使用的问题,包括价格及其毒性问题,渐渐的使用的也就更少了。当然,不断进步的科技,不断更新的固定相在这中间也起了推波助澜的作用。当然,必须说明的一点是,尽管使用的少了,尽管大家都喜欢一开始就用乙腈了,但是不可否认,甲醇和四氢呋喃独有的选择性决定了他们有着乙腈不可替代的作用。
首先,从上面的吸收波长曲线可以看出,尽管THF(212nm)的截止波长比MeOH(205nm)的截止波长多了7nm,但是两者的吸收差别很明显,THF在较高的波长下仍有吸收。所以,当选择THF做部分添加成分时,请关注方法的波长选择以及灵敏度问题。
其次,由于四氢呋喃具有明显的化学不稳定性,其容易氧化成过氧化物。我们知道,溶剂的稳定性是第一要点,如果存在一定的活性较大的过氧化物,很有可能导致样品分析过程中被破坏,从而展现出不真实的杂质谱,影响我们对结果的判断。当然,为了控制THF中过氧化物的含量,通常又会在其中加入化学稳定剂,一般,这个化学稳定剂为BHT(2,5-二叔丁基-4-甲基苯酚)。所以,我们平常买的THF是有两种的,一种是加了稳定剂BHT的,一种是没有加BHT的。这点,请大家在实际工作过程当中注意试剂标签,这些信息是一定会在标签上体现的。从BHT的名称上我们也可以看出来,带苯环,所以,做了处理的BHT很容易带进紫外有吸收的物质,对我们用紫外检测器的测试结果产生影响。
最后,还有一点是四氢呋喃对硬件系统的影响。在说这点之前,我们先来了解一下什么是peek材质。
我们通常说的peek材质是指聚醚醚酮材料,它的英文名称为polyetheretherketone(简称PEEK)。而peek管,peek接头是我们日常工作中通用性很强的色谱配件。Peek材质具有比不锈钢材质更灵活的性能和匹配度,还有比钛合金更具优势的价格。Peek材质具备优异的化学稳定性和生物兼容性。而其这种化学稳定性就决定了我们能使用添加部分四氢呋喃成分的流动相。为什么说是部分添加呢?这是因为,尽管peek材料具有优异的化学稳定性,但是它仍然会在较高浓度的THF环境下有微小的溶胀,这点溶胀可能并不一定会影响到我们方法的稳健性,但是长此以往,系统中的peek管就会变脆,老化。所以,控制THF的比例并且时卡博特炭黑常关注仪器的硬件性能也是在使用THF过程中一个重要的关注点。另外,也有说法其对泵的密封垫也有腐蚀作用。尽管小编认为聚四氟乙烯的密封垫没那么容易坏,但是,关注仪器本身,好好使用并且维护它,也是非常重要的一方面呢!精良的仪器,性能良好的系统能给我们提供更加坚实的保障。
来源:药品质量研究微信公众号
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