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Tris-glycine-SDS电泳缓冲液(1X粉剂)
背景及概述[1][2]
Tris-glycine-SDS电泳缓冲液(1X粉剂) 又叫Tris-甘氨美国3m酸电泳缓冲液,用作生物科技领域内的单链抗体制备用试剂。Tris-甘氨酸电泳缓冲液(pH8.3)由15.1g Tris碱、94g甘氨酸、900mL纯水和50mL 10%SDS溶液制成。蛋白变性和非变性电泳检测在蛋白的生物化学分析实验中,具有重要地位,是蛋白质量和浓度检测的常规方法之一,是分析蛋白片段大小、质量浓度和纯度的重要依据。常规的蛋白电泳经常使用Tris碱-甘氨酸体系,并在变性电泳缓冲液中,添加SDS变性剂,在非变性电泳中不加变性剂。
制备举例[1]
而传统的蛋白电泳缓冲液的制备需要实验工作人员自主完成,包括称量多项药品、准确调节pH值、适当稀释缓冲液等多项步骤。配制过程耗时耗力,且pH值调节过程增加了实验时间和误差,不利于蛋白电泳实验的快速开展。
CN201810338064.0提供了一种供蛋白变性和非变性电泳使用的缓冲液预制试粉,无需称量步骤,无需pH值调节,仅需取一至几份封装在塑料容器或袋中的预制试粉,与一定体积的去离子水混合,即可制得固定浓度和pH值(8.3±0.1)的蛋白电泳缓冲液,减轻了缓冲液配制的人力,提高了缓冲液制备的效率和准确性。
其组成成分及重量如下:基于配制1L一倍(1×)浓度的缓冲液,每份预制试粉含有3.02g的Tris碱、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.68-0.72g的KHPO。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为:Tris碱25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L,KHPO 5.0-5.3mmol/L,pH值稳定在8.3±0.1之间。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式,储存或封装在塑料容器或袋中。
使用方法如下:在室温下,将每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶,即得到1L 1×浓度的电泳缓冲液塑料抗菌剂。此过程无需称量试粉,无需调节缓冲液pH值,通过与一定体积的去离子水混合互溶,快速制备固定浓度、固定pH值的变性或非变性的蛋白电泳缓冲液。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
(1)本发明的预制试粉的使用方法简便快速,使得缓冲液的制备过程可在5-10分钟内完成,提高蛋白电泳实验的整体效率。
(2)本发明试粉所制备的缓冲液,具有较长的电泳寿命和较好的蛋白稳定性,在连续电泳10小时以上的电泳槽中,正负极的pH值变化不超过3%,蛋白结构稳定不被降解。
主要参考资料
[1] CN201710771995.5单链抗体制备用试剂
[2] CN201810338064.0 一种快速制备蛋白变性或非变性电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法
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