去甲异波尔定的制备及应用

去甲异波尔定的制备及应用

来源：凯茵工业添加剂编辑：凯茵化工人气：157 时间：2019-12-20

背景及概述^[1][2]

乌药作为传统常用中药，是一种重要的温胃理气止痛药之一。现代药理研究表明乌药具有广泛的药理活性，如乌药能增强消化液的分泌，还能对抗临床应用大黄引起的腹疼，有兴奋和增强运动节律作用，可以显著抑制溃疡的形成，明显对抗乙醇诱发的细胞损伤，具有细胞保护作用。近来又发现乌药具有较强的镇痛、抗炎作用和显著的抗风湿作用。乌药中的有效成份是去甲异波尔定。《中国药典》2005年版一部中乌药的薄层鉴别和含量测定的指标成分都是乌药醚内酯。乌药醚内酯为倍半萜成分，是乌药的特征性成分，专属性强，作为乌药的真伪鉴别指标较为适宜。但乌药醚内酯为脂溶性成分，在水煎液中的煎出率较低，且含量也较低，作为含量测定的指标不是最佳的选择。因此，从原植物中分离得到该化合物，对质量控制指标、阐明其药理作用以及为新药开发寻找先导化合物具有重要的意义。

结构

制备^[1]

一种去甲异波尔定单体的分离纯化方法，其特征在于：以乌药为原料通过提取、萃取、结晶得到去甲异波尔定单体，具体包括下述主要步骤：

A、提取：将乌药粉碎成粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液，其加入量按照药材重量:乙醇溶液体积=1Kg:（8‑12）L计算，回流提取3‑5次，每次1.5‑3小时，提取液过滤，合并过滤液，浓缩回收乙醇，得50℃下相对密度为1.20‑1.40的浓浸膏待进行下一步萃取处理；

B、萃取：将步骤A所得的浓浸膏加质量百分比浓度为3pvc稳定剂‑4%的稀盐酸溶解，并调pH2‑4，滤出酸水液，用氯仿萃取3‑5次，除去氯仿液，酸水液用浓氨水调pH至8‑10，再用氯仿萃取4‑6次，合并氯仿萃取液，回收滤液至干，得黄色的去甲异波尔定粗品；

C、结晶：按照黄色固体物:甲醇=1g:（10‑1000）ml 计算，将步骤B得到的去甲异波尔定粗品用甲醇、乙醇或丙酮完全溶解，溶解完全后用纳米有机膜过滤，滤液加入2‑5倍量体积的蒸馏水冷藏结晶，根据晶体具体纯度，重复结晶2～3次，直至纯度≥98%，于100℃干燥后即可得到去甲异波尔定单体产品。

药动学^[2]

1)大鼠静脉注射给药后，血浆中去甲异波尔定的浓度迅速下降，在120 min 后血药浓度低于定量限(10 ng·mL)。同时注射给药5 min后，血浆中立即可以检测到代谢物去甲异波尔定-9- O-α-葡萄糖醛酸苷，而且去甲异波尔定-9- O-α-葡萄糖醛酸苷的血药浓度远高于去甲异波尔定的血药浓度，这说明去甲异波尔定在体内生物转化非常迅速。与原型药物相比，去甲异波尔定-9-O-葡萄糖醛酸苷的在体内的消除比较缓慢，在12 h 后血药浓度才低于定量限(25 ng·mL)。大鼠静脉注射给药后，血药浓度数据经PKsolution 2TM 软件按非房室模型处理。比较去甲异波尔定和去甲异波尔定-9-O-α-葡萄糖醛酸苷的药动学参数，并进膨润土行统计学检验。

结果表明静脉注射后，去甲异波尔定和去甲异波尔定-9-O-α-葡萄糖醛酸苷的药动参数t1/2 、AUC0t 、ke 和MRT 之间差异有统计学意义。根据去甲异波尔定在大鼠肝微粒体中的代谢清除率推算，去甲异波尔定在大鼠肝脏的清除率为59.4 mL/min/kg，占大鼠静脉给药后总清除率的31.9%。因此，肝脏代谢是去甲异波尔定体内清除的一条重要途径。

2)灌胃给药后药动学特征

大鼠灌胃给药后，去甲异波尔定迅速吸收，5 min 后就可以检测到，23 min 达到最大血药浓度，随后也迅速消除，120 min 后血药浓度低于定量限。与静脉注射给药一样，大鼠灌胃给药5 min 后，大鼠血浆中立即可以检测到去甲异波

尔定-9-O-α-葡萄糖醛酸苷，而且血药浓度也是大大高于去甲异波尔定原型药物的血药浓度，因此不容忽视。与原型药物相比，去甲异波尔定-9 O-α-葡萄糖醛酸苷的在体内的消除比较缓慢，在24 h后血药浓度才低于定量限(25 ng·mL)。这说明去甲异波尔定吸收快速而且存在着明显的首过效应。

应用^[3]

乌药总生物碱能够显著抑制佐剂性关节炎大鼠继发性足肿胀，对原发性足肿胀也有抑制趋势。同时乌药总生物碱还能够减轻小鼠胶原关节炎的严重程度，减少血清中抗胶原抗体，保护骨关节的损坏，其作用机制是通过阻止脂多糖诱导的RAW264.7细胞的NF-κB激活和MAPKs磷酸化而发挥作用。而去甲异波尔定作为乌药总碱中的主要活性成分（在乌药总碱中的含量为37.8%），具有与乌药总碱相似的药理作用。去甲异波尔定通过下调MAPKs信号通路的活性抑制巨噬细胞的活化和致炎因子的释放，从而显著减少RAW264.7巨噬细胞释放一氧化氮、肿瘤坏死因子和白细胞介素-1β。

但药动学研究表明，去甲异波尔定的生物利用度仅有2.7%，而代谢产物去甲异波尔定-9-O-α-葡萄醛酸苷的血药浓度大大高于其原型药物，且在体内停留时间也超过原形药。去甲异波尔定的动物实验表明能够显著减少关节炎小鼠（CIA）的疾病严重程度，保护关节受损，减少血清中抗胶原蛋白抗体的含量等，药理作用明确且毒副作用小，但由于其自身微溶于水，体内代谢迅速、血药浓度生物利用度低等极大地限制了它在临床上的应用。